德运康瑞CEO李嘉成在发布会开场致辞中表示，德运康瑞作为国内少有的专注于全链条单细胞与空间多组学技术的公司，通过底层技术的不断创新，致力于打造具有国际竞争力的单细胞和空间多组学产品管线。本次在国内首次推出具有自主知识产权的新型RNA原位测序技术，为国内用户提供了一种亚细胞分辨率、高灵敏度、高特异性的空间组学技术手段。

原位测序技术最早在2013年由柯荣秦教授以第一作者身份发表在Nature Methods 期刊，历时多年的技术发展和突破创新，在国内成功商业转化。在发布会上，原位测序技术发明人、德运康瑞副总经理柯荣秦教授为大家详细讲解了该技术的发展历程、原理特点和应用案例。

原位测序技术依赖于锁式探针和滚环扩增技术，是以缺口靶向或条形码靶向为测序策略，同时引入边连接、边测序的化学原理，以滚环扩增产物为测序媒介进而在组织或细胞原位对RNA实现短片段测序的技术。通过4轮连续测序成像一次性最多可以检测出256种靶标mRNA分子。

原位测序技术路线图

新型RNA原位测序技术的第一个核心优势是直接在组织和细胞原位上“点亮”基因表达信号，可以在单细胞甚至亚细胞水平分辨率分析基因表达分布规律，这是目前已经商业化的空间转录组技术难以攻克的关卡。很多组织特定结构非常细微，在空间位置分布异常复杂或者狭长，甚至只有单层细胞或者几个细胞构成，尤为需要原位测序技术在空间位置上的超高清解析能力。第二个优势是原位测序技术可以100%全覆盖在10mm*10mm 组织面积上解码出高达256种基因表达信息。相比现有国外的空间转录组技术，这样的“全景视野”不会遗漏任何组织特征结构或者重要组织病理区域，这从临床诊断应用角度来讲至关重要。

原位测序技术最为常见的应用是与单细胞测序技术互补结合，通过单细胞测序分析得到的细胞标记基因或者功能基因等，设计特异性探针，以在组织原位上聚焦分析这些基因在组织空间位置上的表达模式和分布规律。柯荣秦教授分享了2021年发表在Nature Neuroscience（影响因子 24.884）的神经发育研究合作文章。研究团队利用单细胞测序技术和新型RNA原位测序技术全面解析了神经发育相关基因的空间异质性特征，证明了该技术在神经发育和神经疾病等研究领域的应用价值。

更值得期待是，原位测序技术具备解析肿瘤免疫微环境和空间异质性的强大能力。柯荣秦教授成功在乳腺癌样本和结直肠癌组织绘制了免疫微环境相关基因“分子图谱”。基于该分子图谱可以在特定肿瘤微环境区域构建基因表达调控网络，甚至通过算法识别细胞边界，将基因表达信号点分配到单个细胞，表明原位测序技术未来有望用于肿瘤标志物发现、药物治疗过程中的伴随诊断和临床病理诊断等场景。

发布会上，先能生物基于新型原位测序的探针设计和实验原理，还推出了单分子RNA荧光原位杂交技术（asmFISH）。该技术一次性可以同时验证1~4个靶标分子的表达位置，同样具备高特异性和高灵敏等优点，是单细胞测序和空间组学后续验证的绝佳选择。asmFISH技术实验操作简单、容易上手，同时先能生物也成功开发了SEERNA® ISH RNA荧光原位检测商业化试剂盒，针对不同研究需求进行探针定制，为广大科研工作者提供了高性价比的验证工具，也为个性化临床分子病理应用转化提供了可能。（试用装申请请见文末）

厦门大学医学院许韧教授是先能生物本次发布技术的首批使用者之一。作为特邀嘉宾，许韧教授分享了新型RNA原位测序技术用于验证骨髓组织中髓核细胞亚型的标记基因和干细胞发现研究，进一步证明空间组学技术在干细胞发现中发挥了不可或缺的作用。值得注意的是，该研究还使用了德运康瑞自主研发的Paired-seq单细胞测序技术，充分体现出该平台高效捕获细胞的优势。

此外，厦门大学生命科学学院周大旺和陈兰芬课题组合作在Cell杂志上发表研究论文，使用先能生物asmFISH技术验证了Ctgf和Cyr61两个基因，揭示了肝脏早期肿瘤病灶及小肿瘤中普遍存在糖原过度累积的现象。

德运康瑞旗下先能生物技术总监王春明博士在发布会展示了小鼠嗅球16个基因的原位测序Demo数据结果，并与来自Allen脑图谱数据库中ISH结果进行比对，呈现出较好的一致性。此外，王博士详细讲述了首先面向国内提供一站式空间转录组技术服务流程细节。

最后，各位主讲嘉宾现场精彩解答了在线听众诸多交流的问题。

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为了回馈广大客户对此次发布技术的兴趣，先能生物本次开放了15个名额的SEERNA®ISH RNA荧光原位检测试剂盒的免费试用装（5次反应），请发送姓名、单位、联系方式和研究方向进行邮件申请，或者加入下方微信交流群联系产品经理，先到先得。